中國醫藥大學機構典藏 China Medical University Repository, Taiwan:Item 310903500/25309
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    题名: 以表面膜漿共振技術整合生物感測器與石英晶體微天平系統以建立製備及分析生物晶片之技術平台
    Integration of Biosensor and Quartz Crystal Microbalance to Establish Technology Platform for Preparation and Analysis of Biosensor Chip using Surface Plasmon Resonance Technology
    作者: 龍鳳娣
    贡献者: 中國醫藥大學營養學系
    关键词: 生物晶片;生物感測器;共振;篩選藥物;Biochip;Biosensor;Resonance;Drug screening
    日期: 2004-05
    上传时间: 2010-07-22 16:36:53 (UTC+8)
    摘要: 表面膜漿共振技術為 Biacore AB 公司所研發之 BIACORE X 生物感應器,此 儀器之檢測方法為應用一種物理性的光學現象,當樣品被注入儀器中,樣品經由 液體傳送之微射流系統而到達生物感應晶片的表面時,若樣品中的物質與晶片上 固定之物質結合,則會造成感應晶片表面上質量濃度的變化與折射率之變化,經 感測器(Detector)偵測之後,以共振單位(RU)之數值即時反應出樣品中待分析物 (analyte)與晶片上固定鍵合物(ligand)之間結合和解離的情形。本人實驗室一直致力 於致癌症機制中 Grb2 蛋白質 SH2 區 塊 之 小分子蛋白質(月生月太)抑制物之結構活性 關係研究,期能研發癌症治療之製劑或保健食品。由於正常細胞與癌細胞之細胞 內的訊息是由 Grb2 蛋白質藉由它的 SH2 domain 與活化後之生長因素受體連結而 傳遞訊息,引發致癌蛋白質 Ras 的活化反應。根 據 期 刊 文 獻 之 報 導 已 知 Grb2 SH2 區塊可經由辨識 pYXNX 的氨基酸序列而與生長因子受體 EGFR 蛋白質上的 磷酸化酪氨酸 (pY)結合, 由於 SH2 區 塊 可 以 經 由 與 特 殊 含 磷 酸 化 酪 胺 酸 的 小 胜月太鍵 結 來 調 控 專 一 性 的 蛋 白 與 蛋 白 相 互 作 用 , 本人實驗室設計並 合成了一系列的月生月太抑制物並應用表面膜漿共振之技術研究合成月生月太之結構與活 性關係。本實驗室經由一系列的實驗設計並應用表面膜漿共振之技術已經建立了 快速且靈敏的生物晶片 (蛋白質晶片)分析方法, 可篩選出能抑制 Grb2 SH2 區塊的 小分子月生月太, 因此, 希望藉由產學合作將相關之技術轉移國內研發類似科技儀器 之廠商 Asia New Technology 公司。由 Asia New Technology 公司所研發之 P sensor 2000 儀器,採用壓電石英晶體生物感測技術,檢測方法是以壓電石英晶體做為微 量分子感測的元件,壓電石晶體的共振頻率是量測參數。此研究之目的擬將表面 膜漿共振技術中之重要步驟與技術,包括 :以化學試劑活化生物晶片(蛋白質/月生月太 晶片 ) ,固定鍵合物於應晶片,感應圖之分析方法等,轉移到 P sensor 2000 儀器, 以期建立另一種晶片之分析技術、開發更經濟型之生物晶片,並建立一套跨平台 的蛋白質與蛋白質之間分析技術的模式,發展出快速且具專一性、穩定性的生物 晶片分析技術。但因,將 Grb2 SH2 domain 固定(Immobilization)於壓電石英晶片表 面上之成效不佳,相關技術仍有待突破。因此,本實驗擬根據巳發之相關文獻, 欲先將石英晶體微天平技術之分析方法轉移至表面膜漿共振技術,建立一套跨平台之分析技術的模式,再進一步分析合成胜類似物與 Grb2 SH2 domain 之交互作 用情形。

    Surface plasmon resonance (SPR) technology was developed for BIACORE X biosensor from Biacore AB Company. SPR is an optical system used for detecting real time biomolecular interaction when a sample was injected into the instrument and interacted with a ligand which was covalently attaching to the sensor surface. Cell transudation promote carcinogen protein Ras action reaction by recognition of SH2 domain of Grb2 protein by the active receptor of growth factor. SH2 domain regulates specific protein-protein interaction through linkage with specifically phosphoryl tyrosine peptides, SH2 domain of Grb2 recognizes pYXNX for interacting with EGFR protein. We have analyzed protein-protein interaction by SPR technology and established SPR-based method for screening peptides which inhibited the interaction of Grb2 SH2 domain. The p-sensor 2000 designed by ANT is based on the principle of piezoelectric biosensor. It is made of three portions including electronic oscillation circuit, frequency counter, and piezoelectric quartz of fixed biosensor molecule (p-chip). Piezoelectric quartz crystal consist of quartz crystal slab with a layer of gold electrode on each side. It is the signal conversion component of piezoelectric sensor chip and can convert the result sensed by the sensor molecule into electronic signal and being amplified. The p-sensor 2000 does not need other labeled material such as enzyme and radioactivity to obtain the dynamics of interaction between molecules. It has the advantages of high sensitivity, fast response, and instant inspection. All kinds of inspection such as antibody/antigen, enzyme / substrate, hormone / receptor, and nucleic acid / nucleic acid that based on biotic affinity reactions can be measured by fixing different sensor molecule on the piezoelectric crystal gold electrode for the different analyte.The purpose is to transfer the coating ligand methods and analysis of SPR technology to QCM technology?Ausing our already established Grb2 SH2 research programs. And compare between two biochip technology, to further develop the specifically, stability and fast biochip analysis.
    显示于类别:[營養學系暨碩士班 ] 研究計畫

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