使用噬菌體胜太庫應用於偵測子宮內膜異位瘤與子宮肌瘤細胞之特定標的胜太

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題名:	使用噬菌體胜太庫應用於偵測子宮內膜異位瘤與子宮肌瘤細胞之特定標的胜太 Identification of Novel Peptides Specifically Binding to Endometriosis or Leiomyoma Cells by Screening Phage-Displaying Peptide Libraries
作者:	謝耀元;林志生
貢獻者:	中國醫藥大學醫學研究所
關鍵詞:	子宮內膜異位症;子宮肌瘤;胜.;胜.庫;噬菌體
日期:	2007-07
上傳時間:	2010-07-13 16:29:00 (UTC+8)
摘要:	子宮內膜異位症與子宮肌瘤是停經前婦女二種最常見之婦科疾病與腫瘤，儘管其高好發率，此二種婦科疾病其形成原因與致病機轉並不明確；目前治療子宮內膜異位症與子宮肌瘤之方法中，手術治療仍屬於最主要與有效之治療方式，其他藥物治療，包括腦下垂體抑制劑(GnRH-a, 柳菩林)或其他賀爾蒙藥劑(danazol, estrogen-progesterone combinations, mifepristone)雖已被廣泛臨床使用，然而這些賀爾蒙藥劑治療仍屬於暫時，姑息性或開刀前之暫時性療法，同時這些賀爾蒙藥劑治療亦常合併骨質疏鬆，更年期症候群，雌激素過低，熱潮紅，不正常性子宮出血，背部疼痛，體重上升，青春痘等副作用，因此亦導致這些賀爾蒙藥物治療之接受性降低‧ 近年來，噬菌體勝.庫(phage-display peptide library)開始使用於偵測篩檢特定細胞接受體，鍵結蛋白質等標的勝.，噬菌體勝.庫對於不同分子聚合物之親合力差異，使得對於特定標的蛋白分子之快速分析成為可能，噬菌體勝.庫亦應用於偵測不同細胞株之連結勝.鏈，目前合成短勝.庫已逐漸應用於篩檢各別疾病或腫瘤之標的蛋白之分子親合性分析，同時連結特定細胞之特異性蛋白質或RNA 亦可能與子宮內膜異位症或子宮肌瘤細胞疾病形成與發展有關，噬菌體勝.庫之相關技術與原理亦可結合藥物，運用於使用連接分子高親合性蛋白以針對標的細胞之治療，此研發將有助於提高藥物對特定細胞治療之特異性，並進一步提高其藥物療效並降低藥物毒性‧ 本研究中，我們計劃將使用噬菌體勝.庫來篩檢子宮內膜異位症或子宮肌瘤細胞之特殊聯結勝.，噬菌體勝.庫具有快速偵測特殊聯結勝.鏈之優點，這些特殊聯結勝. 之發現將有助於對於其分子蛋白連結機制與疾病形成機轉之瞭解，將有助於對於子宮內膜異位症與子宮肌瘤特異性藥物之開發，亦提供藥物投入專一性治療特定細胞之管道，以達成對於標的物之拮抗介入性治療，亦有助於瞭解子宮內膜異位症或子宮肌瘤細胞之特殊細胞接受體與相關化合物之分生機轉材料與方法本研究計劃共有20位診斷出患有子宮內膜異位症或子宮肌瘤之台灣女性參與，所有子宮內膜異位或子宮肌瘤之細胞取自於手術切除子宮內膜異位瘤，子宮肌瘤，或切除子宮，將所有子宮內膜異位與子宮肌瘤細胞將分為四組：(1) 子宮內膜異位瘤細胞(n=10); (2) 正常子宮內膜細胞(n=10，控制組，取自第一組之10位病患); (3) 子宮肌瘤細胞 (n=10); (4) 正常子宮肌細胞(n=10，控制組，取自第三組之10位病患). 我們使用合成之噬菌體勝.庫(Ph.D..-C7C及12 phage display peptide library kits)以篩選連結子宮內膜異位瘤或子宮肌瘤細胞之特異性勝.，應用全細胞之篩選技術，以 adsorption-elution-amplification之panning技術，重覆三步驟來篩檢出特異性連結子宮內膜異位瘤或子宮肌瘤細胞之專一勝.，勝.庫將分辨這些腫瘤細胞外圍之特定分子聚合物之勝.組成，使用類似天然聯結鍵之技術原理，噬菌體勝.庫將偵測出連結於子宮內膜異位瘤或子宮肌瘤細胞之小分子勝.鏈，經由重覆篩檢步驟將分離出高特異性之腫瘤細胞專一勝.鏈‧ 我們將分離出數株高特異性連結於子宮內膜異位瘤或子宮肌瘤細胞勝.之噬菌體，這些特異性噬菌體經由enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)技術呈現明顯訊號，將有助於確定其與子宮內膜異位瘤或子宮肌瘤細胞特殊連結之正確性，進一步經由Western blotting技術測試其標的蛋白之濃度表現，最後証實確認之標的噬菌體勝. 將進行DNA序列分析，以確認其對應氨基酸序列，本實驗亦將有助於分析特異性勝.之分生調節機轉‧
顯示於類別:	[醫學研究所] 研究計畫

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