IgA1蛋白脢的體外組裝及其在誘導人細胞分泌素產生的研究

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Title:	IgA1蛋白脢的體外組裝及其在誘導人細胞分泌素產生的研究
Other Titles:	Studies on Molecular Assembly of IgA1 Protease and Its Role in Production of Cytokines
Authors:	(何世屏);林雅玲(Lin,Ya-Ling)
Contributors:	醫學院醫學系學士班寄生蟲學科
Date:	2005-07-31
Issue Date:	2009-09-01 16:18:08 (UTC+8)
Abstract:	大量的研究證明﹕包括流行性感冒噬血性桿菌在內的致病性細菌所產生的IgA1 蛋白.對於細菌的感染性及菌落形成之重要性與其.的含量成正比。此.一方面可以直接導致人體第一線防衛系統的衰減﹐另一方面又可誘導包括IL-1﹑TNF-α﹑IL-6 和IL-8 等在內的細胞分泌素的形成﹐對於細菌的感染﹑在感染區迅速形成菌落及最終導致內部發炎等起.極為重要的作用。在以往的研究中﹐我們已從non-typable 流行性感冒噬血性桿菌中克隆了iga基因﹐並分別表達及純化了IgA1 蛋白.的α-及β-鏈﹐還在體外實驗中證明了重組的α-鏈須在β-鏈存在時才能具有蛋白.的活性。本研究擬在此基礎上進一步研究IgA1 蛋白.中二條鏈的組裝方式及如何誘導細胞分泌素產生的分子機制。研究方法主要採用定點突變的方式在導致此.鈍化的抗體識別位點區置換蛋白質的殘基。突變體基因制備完成後將其置換正常的基因序列﹐然後克隆到表達載體上。其次便是分別表達及純化重組的二條鏈的突變體(.)。本研究擬在β-鏈的抗體識別位點區中的五個親水殘基及α-鏈的抗體識別位點區中的三個親水殘基上制備突變體蛋白.鏈。這些重組的突變體IgA1 蛋白.鏈和正常的重組IgA1 蛋白.鏈可形成六十個不同的新的蛋白.組合用於功能方面的研究。功能研究包括水解人類的IgA1﹐誘導人呼吸道細胞的細胞分泌素的形成及水解合成受質的動力學分析等。
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